烏梢蛇PCR試劑盒

烏梢蛇（Zaocysdhumnades）又名長溜、烏梢鞭、烏-藥蛇，為游蛇科動物。其體形較大，無毒，生活在丘陵地帶，以蛙類、蜥蜴、魚類、鼠類等為食，廣泛分布于我國各地。烏梢蛇入藥被廣泛使用，具有祛風濕，通經絡，止痙之功效。主治風濕頑痹，肌膚麻木，筋脈拘攣，肢體癱瘓，破傷風，麻風，風疹疥癬。因此，檢測烏梢蛇 DNA 具有重要意義。

產品內容：

注意：

1.引物干粉在使用前需要短暫離心，然后在離心管中加入 110 μL 的超純水充分混勻后再使用，未用完的需要-20℃保存。

2.為避免擴散傳染性病原，本產品不提供活體樣品做陽性對照，只提供專一的 DNA 片段作為陽性對照。

產品優(yōu)勢：

1.即開即用，用戶只需要提供樣品 DNA 模板。

2.產品經過精心優(yōu)化，分析靈敏性能到達 100 拷貝/反應。

3.提供陽性對照，便于區(qū)分假陰性樣品。

4.特異性高，引物是根據烏梢蛇 DNA 高度保守區(qū)設計，insilico分析發(fā)現它只能檢測烏梢蛇，不會跟除此之外的其他的 DNA 發(fā)生交叉反應。

5.本產品足夠 50 次 20 μL 體系的常規(guī) PCR 反應。

6.本產品只能用于定性實驗，不能用于定量實驗。

7.本產品只能用于科研。

儲存條件及有效期：

低溫運輸，-20℃保存，保存期限為 24 個月。

自備試劑：

樣品 DNA

1. 如果有 N 個樣品，必須設置 N+2 個提取反應，多出的兩個中一個是 PC（樣品制備陽性對照），一個是 NC（樣品制備陰性對照）?？梢杂?10 ?L 真菌通用 PCR 陽性對照（1×10E7 拷貝/?L，本試劑盒提供）再加上一定量的水作為制備的陽性對照（加水后其總體積跟樣品一樣，樣品體積多少取決于  所用試劑盒的要求）。可以用水作為制備的陰性對照。

2.用自選方法純化上述 N+2 個樣品的 DNA。本試劑盒跟市場上大多數 DNA-提取試劑盒兼容。也可以選用本公司的核酸-提取試劑盒或免提取核酸釋放劑。

應用范圍：

常規(guī)PCR；T/A克隆；菌落PCR鑒定。

PCR過程：

1.變性

當反應混合物加熱0.5至2分鐘至94°C時，發(fā)生變性。

由于 DNA 兩條鏈之間的氫鍵斷裂，形成單鏈DNA。

單條 DNA鏈現在充當合成其他 DNA鏈的模板。

2.退火

持續(xù)約20至40秒，反應溫度降至54至60℃。

在這種情況下，引物附著在模板 DNA的互補序列上。

引物序列是20-30個堿基長的單鏈 DNA或RNA片段。

它們充當 DNA生產的前體。

有兩個引物-正向引物和反向引物一一兩條分離的鏈以相反的方向延伸。

3.延伸

在此階段溫度升高至72至80攝氏度之間。

Taq聚合酶將堿基固定到引物的3'未端。結果,DNA從5'延伸至3'。

Taq聚合酶可以承受極-高的溫度。結果產生雙鏈DNA分子。

為了在短時間內獲得多個感興趣的 DNA序列，這三個過程需要進行20-40次。

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