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產(chǎn)品名稱:

大腸桿菌(O157:H7)熒光PCR試劑盒

產(chǎn)品型號: 產(chǎn)品時間: 2023-03-08
大腸桿菌(O157:H7)熒光PCR試劑盒對大腸桿菌(O157:H7)的快速準確鑒定預(yù)防和檢疫有著重要作用。其易感染性和潛伏性給畜牧業(yè)以及貿(mào)易帶來嚴重的經(jīng)濟損失,為此本公司開發(fā)了簡單快捷的大腸桿菌(O157:H7)熒光定量PCR檢測試劑盒。

產(chǎn)品概述

大腸桿菌(O157:H7)熒光PCR試劑盒【檢驗原理】

本試劑盒采用探針法實時熒光 PCR 技術(shù),設(shè)計一對大腸桿菌(O157:H7)特異性引物,結(jié)合一條特異性探針,用熒光 PCR 技術(shù)對大腸桿菌(O157:H7)的核酸進行體外擴增檢測,用于臨床上對病原學(xué)輔助診斷。

 

【儲存條件及有效期】

-20℃±5℃,避光保存、運輸、反復(fù)凍融少于 7 次,有效期 12 個月。

【適用儀器】

ABI 、安捷倫 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、eppendorf 等系列熒光定量 PCR 檢測儀。

說明:不同批號的試劑盒組分不可交互使用。

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1.1 DNA 提取

1) 對上述處理好的標本加入等體積核酸提取液(固體標本加入50μL 核酸提取液), 100℃恒溫處理 10min,13,000 rpm 離心 5min,取上清液轉(zhuǎn)移至新的 1.5mL EP 管,-20℃保存;

2) DNA 的提取也可以采用上海晅科生物科技有限公司生產(chǎn)的DNA 提取試劑盒(離心柱提取法),請嚴格按照試劑盒說明書進行操作。

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2. 檢測方法的局限性

a. 樣本檢測結(jié)果與樣本收集、處理、運送以及保存質(zhì)量有關(guān);

b. 樣本提取過程中沒有控制好交叉污染,會出現(xiàn)假陽性結(jié)果;

c. 陽性對照、擴增產(chǎn)物泄漏,會導(dǎo)致假陽性結(jié)果;

d. 病原體在流行過程中基因突變、重組,會導(dǎo)致假陰性結(jié)果;

e. 不同的提取方法存在提取效率差異,會導(dǎo)致假陰性結(jié)果;

f. 試劑運輸,保存不當(dāng)或試劑配制不準確引起的試劑檢測效能下降,出現(xiàn)假陰性或定量檢測不準確的結(jié)果;

g. 本檢測結(jié)果僅供參考,如須確診請結(jié)合臨床癥狀以及其他檢測手段。

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1.1 結(jié)果判斷

陽性:檢測通道 Ct 值≤35.0,且曲線有明顯的指數(shù)增長曲線。

可疑:檢測通道 Ct 值>35.0,且出現(xiàn)典型擴增曲線的樣本建議重復(fù)試驗,重復(fù)試驗結(jié)果出現(xiàn) Ct 值≤35.0 和典型擴增曲線者為陽性,否則為陰性。

陰性:樣本檢測結(jié)果無 Ct 值且無明顯的擴增曲線。

 

3. 質(zhì)控標準

陰性質(zhì)控品:無明顯擴增曲線或無 Ct 值顯示;

陽性質(zhì)控品:擴增曲線有明顯指數(shù)生長期,且 Ct 值≤32; 以上條件應(yīng)同時滿足,否則實驗視為無效。

 

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